OBSERVACIÓN DE LOS TEJIDOS EPITELIAL DE REVESTIMIENTO EN LA BOCA Y EPIDERMIS DEL PUERRO

OBSERVACIÓN DEL TEJIDO EPITELIAL DE REVESTIMIENTO EN LA BOCA
y
OBSERVACIÓN DE LAS CÉLULAS EPIDÉRMICAS DEL PUERRO

Víctor Amorós Reche                  Anatomía Aplicada 1º BAT

1- INTRODUCCIÓN TEÓRICA

El tejido epitelial es aquel tejido formado por una o varias capas celulares, que reviste distintas superficies del cuerpo, tales como cavidades internas u órganos huecos. Se establecen distintas clasificaciones: simple o estratificado; escamoso, cuboidal o columnar; queratinizado (o no), ciliado, etc; de revestimiento, glandular, sensorial, respiratorio, intestinal;...
El interior de la boca está tapizado por la mucosa bucal, formada por el tejido epitelial plano estratificado no queratinizado de revestimiento.

Las zonas corporales húmedas sujetas a desgaste (tales como la boca, la epiglotis, el esófago, las cuerdas vocales verdaderas o la vagina) están tapizadas por este tipo de tejido, que produce secreciones. Formado por varias capas de células, estas están dispuestas de forma plana y paralela a la superficie epitelial, y siguen el siguiente esquema:

Las células superficiales tienen forma aplanada o escamosa, y existe poco espacio entre ellas. Las células medias adquieren una forma polimorfa. Finalmente, las células basales tienen forma cúbica.

Bajo este epitelio de revestimiento se encuentra una membrana basal, y debajo de esta el tejido conectivo, irrigado por capilares sanguíneos.

Las principales funciones de este tejido son la protección ante daños o digestiones químicas, impedir la entrada de microorganismos y evitar la deshidratación del órgano al que tapiza.

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La segunda parte de la práctica consistirá en la observación de las células de las partes verde y blanca de un puerro (Allium ampreloprasum).
Estas células son vegetales, por se diferencian de las animales, a grandes rasgos, por poseer pared celular, no tener centríolos y sí contar con cloroplastos. 
Los cloroplastos son los orgánulos vegetales encargados de hacer la fotosíntesis (reacción en la cual las plantas transforman energía orgánica en química). En su interior se encuentra una sustancia llamada clorofila, que capta la luz del sol, necesaria para la fase lumínica de la fotosíntesis, en la cual se absorbe dióxido de carbono y se libera oxígeno. A continuación, se produce la fase oscura, que con los productos restantes de la fase lumínica, la planta elabora carbohidratos, necesarios para su crecimiento.
Además, las plantas (principalmente en las partes herbáceas) tienen unas agrupaciones de células en la epidermis (capa superficial) llamadas estomas. Estos consisten en la unión de dos células oclusivas que delimitan y regulan la apertura de un poro, llamado ostíolo, el cual es la via de entrada y salida del oxígeno y el dióxido de carbono durante la respiración y la fotosíntesis.

2- MATERIAL NECESARIO

- Papel de filtro

- Portaobjetos y cubreobjetos.

- Pinzas de laboratorio

- Mechero de alcohol

- Alcohol etílico

- Palillos de madera

- Vidrio reloj

- Cuentagotas

- Tinción azul de metileno

- Microscopio

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- Puerro
- Papel de filtro
- Portaobjetos y cubreobjetos
- Bisturí
- Pinzas
- Cuentagotas
- Agua destilada
- Tinción azul de metileno
- Microscopio

3- HIPÓTESIS INICIAL

En cuanto a la parte de observación de células animales, al raspar la pared interna de la mejilla, se extraerán fragmentos del epitelio de revestimiento mezclados con saliva. Después serán analizados en el microscopio, mostrando células ordenadamente juntas, más blanquecinas que el fondo, azulado.
Por lo que respecta a la observación de células vegetales, se observarán el el microscopio células dispuestas en un orden, con pared celular definida y forma regular cuadrada.

4- OBJETIVOS

Conocer las funciones y estructura del tejido epitelial de revestimiento plano, estratificado y no queratinizado.
Estudiar la disposición de los estomas en los tejidos vegetales y su función.

Saber esterilizar el material de laboratorio mediante un mechero de alcohol.
Descubrir la capa epidermis del puerro.

Aprender a preparar una muestra con tinción azul de metileno y cubreobjetos.

Observar y comparar la estructura de las células de estos tejidos epitelial animal y vegetal.

Practicar el enfoque con el microscopio y fotografiar los resultados.

5- MÉTODO DE EXPERIMENTACIÓN

Práctica de observación del tejido epitelial animal.

1- Clase de introducción teórica a la práctica.
2- Se lavan las manos.

3- Se prepara el material

4- Se impregnan los portaobjetos en alcohol.

5- Con ayuda de una pinza, se mueve en círculos el portaobjetos a 10 cm del mechero.

6- Se raspa el interior de la mejilla con un palillo de madera.

7- Se deposita el raspado junto con saliva en un portaobjetos.

8- Se coloca el portaobjetos sobre un vídeo reloj y se tiñe la muestra con tinción azul de metileno.

9- Se esperan dos minutos y se elimina el sobrante del tinte mediante la técnica del frotis.

10- Se coloca el cubreobjetos encima de la muestra y se seca el sobrante con papel.

11- Se observa en el microscopio a 40 y 100 aumentos.

12- Se limpia el material utilizado.

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Práctica de observación de la epidermis del puerro:

1-  Introducción teórica a la práctica.

2-  Se lavan las manos.

3- Se prepara el material.

4- Se extrae mediante bisturí y pinzas la epidermis (capa fina superficial) de las partes verde y blanca del puerro.  

5- Se coloca 1 cm^2 de cada tipo de epidermis en dos portaobjetos.

6- La muestra de la parte blanca se tiñe con tinción azul de metileno.

7- Se hidrata con agua destilada la muestra de la parte verde.

8- Después de esperar 2 minutos, se coloca el portaobjetos y se seca el sobrante de agua y tinte.

9- Se observan las muestras en el microscopio.

6- OBTENCIÓN DE RESULTADOS

Frotis de la mucosa bucal, ocular 10x, objetivo 4x.

Frotis de la mucosa bucal, ocular 10x, objetivo 10x.

Epidermis con estomas de la parte verde del puerro, ocular 10x, objetivo 4x

Epidermis con estomas de la parte verde del puerro, ocular 10x, objetivo 10x

Epidermis con estomas de la parte blanca del puerro, ocular 10x, objetivo 4x

Epidermis con estomas de la parte blanca del puerro, ocular 10x, objetivo 10x

7- ANÁLISIS DE RESULTADOS

En el caso de la observación del tejido epitelial, a causa de la técnica del frotis, las células, con forma redondeada pero irregular, aparecen dispersas. También tienen un núcleo definido.

En cuanto a la observación de la epidermis del puerro, en ambas muestras (parte blanca y parte verde) se observan células alargadas, estomas visibles distribuidos entre ellas y membrana celular definida. En el caso de la parte verde a 100 aumentos, se pueden ver las células oclusivas. En la parte blanca se observan diversos orgánulos en el interior de las células.

8- CONCLUSIONES

Las células del tejido animal se presentan en forma de escamación a causa del frotis

Las células de las partes aérea y blanca del puerro contienen estomas visibles a 40 aumentos.

Las células registradas del tejido animal tienen forma irregular y núcleo visible, mientras que las vegetales presentan forma regular y estomas definidos.

9- ERRORES DE LA PRÁCTICA

Hubo errores en la selección del material.

El material no fue totalmente esterilizado.

Hubo una combustión accidental de etanol en un cristalizador.

Se extrajo poco tejido epitelial de revestimiento y las células se vieron muy dispersas a causa del frotis.

Se acumuló aire en la muestra.

El secado del sobrante de la tinción no fue totalmente higiénico.

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No se esterilizó el material.

El área de trabajo no estuvo completamente limpia.

La medida de las muestras no fue completamente regular.

La limpieza del sobrante de agua y tinte no fue completamente correcta.

10- CONFIRMACIÓN O RECHAZO DE LA HIPÓTESIS

La observación microscópica del tejido epitelial de revestimiento (plano estratificado no queratinizado) desmiente la hipótesis inicial, ya que las células aparecen más oscuras que el fondo y de forma dispersa a causa del frotis.

En cuanto a la observación del tejido epidérmico del puerro, se confirma la hipótesis salvo por el hecho de que las células eran imaginadas cuadradas en lugar de alargadas.